Tradotto presso l'Università di Bari, Italia

Il Progetto Biologico > Biologia Molecolare > DNA ricombinante

Tecniche sul DNA ricombinante

Problema 6: Applicazioni


Guida per facilitare la risposta a questo problema

I frammenti di DNA generati dalle endonucleasi di restrizione, separati per elettroforesi su gel e trasferite col blotting su una membrana filtro vengono vengono rivelati con sonde radioattive di DNA. Questa procedura è denominata: ?

Guida

La tecnica del Southern

Transferimento di frammenti di DNA su fogli di nitrocellulosa
I frammentii di DNA vengono trasferiti su fogli di nitrocellulosa dove si legano.

I frammenti di DNA vengono denaturati e separati con l'elettroforesi su gel

I frammenti vengono traferiti su fogli di nitrocellulosa e fissati per riscaldamento

I Blot vengono fatti reagire con sonde radioattive di RNA o DNA che si legano al DNA complementare

Viene utilizzata l'autoradiografia per rivelare i frammenti

Fissaggio dei frammenti di DNA
I frammenti denaturati di DNA sono fissati in forno.

Viene aggiunta una sonda radioattiva che può ibridare con una sequenza genica sul DNA.

Il foglio viene risciacquato e posto a contatto con un pellicola per raggi X per l'autoradiografia.

Problema 6| Risposta | Problema 7

Glossario

Il Progetto Biologico > Biologia Molecolare > DNA ricombinante


Il Progetto Biologico
University of Arizona
Traduzione a cura del Prof. Erminio Terio - Università di Bari
Contact the Development Team

http://www.biology.arizona.edu
All contents copyright 1996-99. All rights reserved.